T細胞亞群檢測試劑盒簡直太好用了
標本制備：
取肝素抗凝（25μl/ml）的靜脈血1～2ml，PBS稀釋1-2倍后，沿裝有等量淋巴細胞分離液的試管壁混勻緩慢加至液面上層，保持兩種液體界面清晰，離心（2000轉(zhuǎn)/分）15-20分鐘，吸取兩液面交界處的單個核細胞層，加5倍PBS，離心（1000轉(zhuǎn)/分）5分鐘，棄上清液，沉淀即為單個核細胞。利用試管中剩余的少許回流液體（約一滴）混勻細胞，制成單個核細胞懸液。滴30μl細胞懸液于載玻片上，靜置2分鐘使細胞下沉粘附于玻片上，吸去液體，快速吹干或37℃溫箱1小時烤干。或用PBS將單個核細胞調(diào)至2×105個/ml，離心涂片機1000轉(zhuǎn)離心1-2分鐘制片，快速吹干或37℃溫箱1小時烤干。涂片前取防脫片劑5-10μl均勻推片，亦可用棉簽粘取防脫片劑均勻涂于干凈玻片上，待干后制備細胞涂片，以防掉片。
T細胞研究中通常研究的三個亞型包括
●殺傷性T細胞(細胞毒性T淋巴細胞: CD8+) ，這種細胞可識別抗原，抗原由與宿主細胞結(jié)合的致病原釋放。殺傷性T細胞能夠識別不同的細胞類型和病原體并與其發(fā)生相互作用。T細胞受體結(jié)合外來抗原，觸發(fā)細胞毒素釋放進入受感染的細胞，導(dǎo)致細胞死亡。
●輔助T細胞(Th細胞: CD4+)，可促進免疫系統(tǒng)對抗感染。Th細胞識別并結(jié)合致病抗原，導(dǎo)致可溶性因子(細胞因子)的釋放，進而將信號傳導(dǎo)至免疫系統(tǒng)的其余部分以啟動應(yīng)答。Th細胞分為不同的亞型，包括Th1細胞和Th2 細胞。Th1細胞可結(jié)合具有吞噬功能的巨噬細胞和樹突細胞。Th2 細胞結(jié)合和激活B細胞，這是產(chǎn)生抗體的必要過程，從而保證對特定細菌或病毒感染的終生免疫力。
●調(diào)節(jié)性T細胞(Treg 細胞: CD4+、 CD25+、Foxp3+、 CD127+)，可保持免疫系統(tǒng)功能正常。一旦發(fā)生了免疫反應(yīng)，這類細胞可確保反應(yīng)得到終止。這種調(diào)節(jié)機制抑制了免疫活性，從而防止過度免疫反應(yīng)。正常運作的Treg 細胞對預(yù)防自身免疫病至關(guān)重要。
注意事項：
1.免疫細胞化學檢測是一種包含多步驟的檢測方法，試劑的選擇、樣本的處理、涂片的制備、染色及其結(jié)果的判讀均需要進行專業(yè)的培訓。
2.任何陽性或陰性的解讀，應(yīng)由病理科醫(yī)生結(jié)合病理形態(tài)學，表現(xiàn)及其它檢測方法進行，不作為單獨的診斷指標。
3.復(fù)染過度或不足都可能影響結(jié)果的判讀。
4.陰性結(jié)果表示未檢出抗原，不一定表示樣本中無該抗原存在，待測抗原編碼基因變異，抗原低表達或抗原修復(fù)不當?shù)?，都會造成抗原無法檢出。
5.本試劑僅對經(jīng)處理的人外周血細胞進行驗證，不做其他用途
6.試劑盒使用中，應(yīng)有適當?shù)姆雷o措施，以避免試劑同皮膚和眼睛接觸。
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