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肥達(dá)氏實(shí)驗(yàn)試劑:抗傷寒桿菌O血清,現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎搶購
更新時(shí)間:2017-11-09   點(diǎn)擊次數(shù):3067次

肥達(dá)氏實(shí)驗(yàn)試劑:抗傷寒桿菌O血清,現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎搶購

抗傷寒桿菌O(或H)血清抗體(使用說明書)

 

本品是由傷寒桿菌O(或H)抗原免疫家兔獲得的抗傷寒桿菌O(或H)血清抗體,與傷寒桿菌O(或H)抗原37水浴箱18小時(shí)測得效價(jià)。

試驗(yàn)方法:

1.取清潔小試管8支,依次編號。

2.于小試管內(nèi)各注入0.5ml生理鹽水。 

3.于*管內(nèi)加入1:10稀釋的抗O(或H)血清0.5ml,用1ml吸管吹吸三次,混勻,吸出0.5ml注入第二管作對倍稀釋,……依次稀釋至第7管,棄去0.5ml,第8管為對照。 

4.各管內(nèi)注入傷寒桿菌O(或H)菌液0.5ml;

5.加完菌液后,振蕩試管架,混勻,放置37水浴箱18小時(shí)后觀察結(jié)果。

快速檢測法(H抗原抗體反應(yīng))置于50水浴箱2-4小時(shí)看結(jié)果,但其效價(jià)要比過夜觀察低1-2個(gè)滴度。

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結(jié)果分析:

 先觀察對照管,正確結(jié)果應(yīng)無凝集現(xiàn)象,再觀察各試驗(yàn)管的凝集現(xiàn)象,凝集程度以“ +”多少表示之。 

++++ )zui強(qiáng),上液澄清,細(xì)菌全部凝集沉淀于管底。 

+++)強(qiáng),上液輕度混濁,細(xì)菌大部分凝集沉淀于管底。

+)弱,上液混濁,細(xì)菌少部分凝集。

-)不凝,液體呈乳狀與對照管相同。

 

效價(jià)判定:

以能出現(xiàn)“+ ”凝集現(xiàn)象的血清zui高稀釋度為該血清的凝集效價(jià)。 

即第17孔的血清zui終稀釋度分別為1:40,1:80,1:1601:320,1:640,1:12801:2560。

 

傷寒、副傷寒及變形菌診斷菌液(使用說明書)

本品系用甲醛配置溶液滅活的傷寒、副傷寒即變形桿菌分別制成,供肥達(dá)氏(Widal)和外斐氏(Weil-Felix)反應(yīng)用。

 

濃度:7.0*109/ml

 

使用方法:

以生理鹽水溶液稀釋成含菌7.0*108/ml的懸液。將待檢血清稀釋成1:10、1:20……1:1280(每管0.5ml),然后逐管分別加入稀釋菌液各0.5ml,zui后血清稀釋度為1:20、1:40……1:2560,充分震蕩使其混勻,于35-37℃放置16-20小時(shí),判定結(jié)果。

根據(jù)凝集反應(yīng)的強(qiáng)弱或有無,分別以++++、+++、++、+、-記錄,以清晰見到凝集反應(yīng)(+)的zui高稀釋度為凝集效價(jià)。

 

保存:2-8℃避光保存,在有效期內(nèi)使用

 

注意事項(xiàng):

1.      應(yīng)在光亮處先觀察管底凝集狀態(tài),然后輕輕搖動(dòng)判定結(jié)果。

2.      菌液稀釋后應(yīng)及時(shí)使用。

3.      菌液有搖不散的凝塊時(shí),不能使用。

 

 

 

肥達(dá)凝集試驗(yàn)

 

標(biāo)本準(zhǔn)備:血清,靜脈血3ml不抗凝。

 

原理:用已知傷寒沙門菌菌體(O)抗原和鞭毛(H)抗原及甲、乙、丙3種副傷寒沙門菌鞭毛抗原的診斷菌液,與被檢血清作細(xì)菌凝集反應(yīng)。若被檢血清中有抗體存在,可與相應(yīng)抗原起反應(yīng),出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象為陽性。

 

試劑:診斷菌液有傷寒O、H及副傷寒A、B、C,共5種。

使用時(shí)用生理鹽水稀釋成每毫升含7~10億(7*108~1*109)個(gè)菌的懸液備用。

 

檢測步驟:

1.取lOmm×lOOmm試管5排,每排8支。

2.另取15mm×lOOmm試管1支,加生理鹽水4.75m1及患者血清0.25ml混合,成為1:20稀釋血清。

3.每排第l管內(nèi)各加1:20稀釋血清0.5ml。

4.在剩余的2.5ml稀釋血清(1:20)中加人生理鹽水2.5ml,成為1:40稀釋血清。

5.再取1:40的血清,分別加入每排第2管中,每管0.5ml。在剩余的2.5ml稀釋血清(1:40)中,加入生理鹽水2.5ml,成為1:80稀釋,再加入每排第3管中,每管0.5ml,如此操作,直至加完每排第7管為止。

6.每排zui后1管各加生理鹽水0.5ml,作為不含血清的菌液對照。

7.取5種菌液充分搖勻,每種菌液加1排,血清zui終稀釋度分別為1:40、1:80、1:160直至1:2560。振蕩混合,置37C水浴16~20h后觀察結(jié)果。

 

結(jié)果判斷:

先觀察液體部分清晰程度,然后輕輕搖動(dòng)試管,觀察管底有無凝塊浮起:

1.液體澄清、管底有凝塊、細(xì)菌*凝集者(100%凝集),為柵++++。

2.液體微混濁、管底有明顯凝塊、細(xì)菌大部分凝集者(75%凝集),為+++。

3.液體較混濁、管底有明顯凝塊、細(xì)菌中度凝集者(50%凝集),為++。

4.液體混濁、管底無凝塊、細(xì)菌輕度凝集者(25%凝集),為+。

5.液體混濁、無凝集現(xiàn)象,為陰性。

6.對照管均勻混濁無凝集現(xiàn)象。

7.被檢血清出現(xiàn)++凝集的zui高稀釋倍數(shù)為凝集效價(jià)。如第3管出現(xiàn)仲凝集,則判為1:160陽性;如各管均無凝集現(xiàn)象,則判為<l:40。

 

正常參考值:傷寒沙門H凝集效價(jià)1:80以下,傷寒沙門菌O凝集效價(jià)及各型副傷寒沙門H凝集效價(jià)均在1:40以下。

 

注意事項(xiàng):

1.過去曾預(yù)防接種傷寒、副傷寒疫苗者,H抗體效價(jià)明顯升高,并持續(xù)數(shù)年,而O抗體低于正常值。

2.以往患過傷寒病或曾接種傷寒疫苗,新近又感染流行感冒或布魯病,可產(chǎn)生價(jià)H抗體,O抗體則較低,但H抗體很快消失,此種反應(yīng)稱回憶反應(yīng)。

3.由于人們在日常生活中可能發(fā)生隱感染而產(chǎn)生抗體,尤其在流行地區(qū)正常人的凝集效價(jià)可稍高,故在判斷結(jié)果時(shí)應(yīng)考慮本地區(qū)正常人群的自然凝集效價(jià)水平作為參考。

4.沙門菌屬各菌種之間有某種共同抗原,在凝集試驗(yàn)中可能出現(xiàn)類屬交叉凝集反應(yīng),但效價(jià)較低。

5.陰性結(jié)果不能*排除傷寒的可能,應(yīng)注意有10%左右已確診為傷寒者在整個(gè)病程中抗體效價(jià)始終不升高。這可能與早期應(yīng)用抗生素、藥物抑制、免疫耐受和缺陷有關(guān)。

6.肥達(dá)反應(yīng)特異性不高,機(jī)體免疫功能紊亂、結(jié)核、敗血癥、病毒性肝炎及部分血吸蟲患者可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。

7.溶血、菌液過濃等均會(huì)影響結(jié)果。菌液過期或產(chǎn)生自凝者不宜使用。 

 

肥達(dá)氏實(shí)驗(yàn)試劑(目錄)

 

抗傷寒桿菌H血清

抗傷寒桿菌O血清

傷寒桿菌H菌液

傷寒桿菌O菌液

甲型副傷寒桿菌菌液

乙型副傷寒桿菌菌液

丙型副傷寒桿菌菌液

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